Hva er en Biotin antistoff?

I motsetning til hva man kanskje først tenker, er en biotin antistoff ikke et stoff som er reist mot biotin. Snarere en biotin-antistoff er et antistoff som er blitt konjugert til
biotin. Biotin binder seg sterkt til en ligand - avidin - som kan, i sin tur, være konjugert til lys-påvisbart molekyler slik som fluoroforer. Biotin og avidin danner et av de sterkeste biologisk relevante kovalente bindinger kjente, noe som gjør biotin- og avidin-konjugert ligand /reseptor enheter spesielt nyttige i vitenskapelige studier.

Biotin er et B-kompleks vitamin - vitamin B7. Det er et så lite molekyl som multiple biotin-molekylene kan bli konjugert til et enkelt monoklonalt eller polyklonalt antistoff. Det faktum at biotin er også vannløselige tillater større fleksibilitet i buffersystemer enn om den var uoppløselig. For større spesifisitet, er monoklonalt antistoff konjugering til biotin ofte anbefalt over polyklonale antistoff konjugering. Den biotin molekylet kan være direkte bundet med antistoffet av interesse, eller det kan være knyttet sammen gjennom en molekylær hale for å tillate mer bevegelsesfrihet.
Ad

biotin ligand avidin er funnet i egg albumin. Det kan være billig gjort og lett isolert. Flere avidin-molekyler vil binde seg til hver biotin reseptor, amplifisering av en enkelt antistoff deteksjonssignal. Når en biotin antistoff holder et antigen av interesse, kan en eksperimentator deretter eksponere komplisert å avidin konjugert til fluoroforer, noe som gjør det komplekse påvises. Gjennom fluorescerende bildebehandling, kan det biotin antistoffet og avidin-konjugert ligand oppdages med lysmikroskopi, og antigener av interesse kan studeres in situ
.

Selv om etablering og bruk av en biotin antistoff og et fluorescens-merket avidin-molekyl er en vanlig løsning for antigen gjenkjenning, alternativer eksisterer det fortsatt gjøre bruk av biotin /avidin-kompleks. Binding biotin til en ligand som en neurotoxin kan være fordelaktig i påvisning av plassering av neuronale reseptorer påvirket av neurotoxin aktuelle. Det er også mulig å bøye biotin til en nukleotidsekvens, slik som budbringer ribonukleinsyre (mRNA) for å finne hvor disse nukleotidsekvenser blir oversatt til proteiner, eller for å detektere cellulært mRNA regulering.

Det er mulig å kjøpe biotinylerte polyklonale eller monoklonale antistoffer, skjønt biotinylert antistoffproduksjon er innenfor evnen til mange forskere. Protokoller kan bli funnet på nettet tyder antistoff Biotinylation metoder, men de fleste får fulgt protokoller direkte kobling biotin til et antistoff i stedet foreslå hvordan du intercalate en molekylær spacer. Molekylære avstandsstykker mellom biotin og tilhørende antistoff tillate større avstand for å avsløre flere molekyler til bindingssteder, og disse biotin antistoffer vanligvis kjøpes snarere enn gjort.