Pseudomonas-testing: Metoder, klinisk betydning og resistensbestemmelse

Hva er Pseudomonas?

Pseudomonas aeruginosa er en Gram-negativ, aerob, ubikvitær bakterie. Viktig opportunistisk patogen (sykehusinfeksjoner, cystisk fibrose, sår, urinveisinfeksjoner, pneumnoni, sepsis). Kendetegn: multiresistens, biofilmdannelse, virulensfaktorer (eksotoxiner, elastase, alginat).

Indikasjoner for testing

• Klinisk mistanke om infeksjon (feber, leukocyturi, purulent sår, pneumoni, sepsis).
• Screening ved innleggelse (CF-pasienter, intensivavdeling, transplantasjon).
• Overvåking av utbrudd / kolonisering (miljøprøver, hender, utstyr).
• Kvalitetskontroll (vann, legemidler, kosmetikk – farmakopøekrav).

Standard mikrobiologisk arbeidsflyt

1. Inokulering: Blodagar, MacConkey, cetrimide agar (selektiv for P. aeruginosa – grønn pigment pyoverdin, sød lugt). Inkubasjon 37°C, 18–24 timer (opp til 48 h).
2. Identifisering: Kolonimorfologi, oksidas positiv, gramfarging, biokjemisk panel (API 20NE, VITEK 2, MALDI-TOF MS – rask, sikker).
3. Resistensbestemmelse (AST): Diskdiffusjon (EUCAST/CLSI) eller MIC (broth microdilution, automatiserte systemer). Viktige antibiotika: piperacillin-tazobactam, ceftazidim, cefepim, meropenem, imipenem, aztreonam, amikacin, tobramycin, ciprofloxacin, levofloxacin, colistin (polymyxin E).
4. Mekanismebestemmelse (ved mistanke om spesielle resistenser): Carbapenemase (KPC, NDM, VIM, IMP, OXA-48) – fenotypisk (Carba NP, mCIM, EDTA-modifisert disk) + molekylært (PCR, sekvensering). ESBL, AmpC, metallo-β-laktamase.

Raskere metoder

• MALDI-TOF MS: Identifisering på minutter fra koloni.
• Molekylære paneler (FilmArray, BioFire, Verigene, Unyvero): Syndrom-basert (blodkultur, respirasjon, urin) – deteksjon + resistensgener på 1–2 timer.
• NAAT (PCR) for spesifikke gener: Hurtig screening for carbapenemase-produsenter (CPE).
• Fenotypisk hurtig-AST: Flow cytometri, MALDI-TOF basert (MBT-AST), mikrofluidikk – fremdeles under evaluering/implementering.

Miljøprøvetaking

• Svelgprøver (hender, overflater, utstyr, vann, luft).
• Membranfiltrasjon (vann) + agarplatering.
• Kvantifisering (CFU/mL, CFU/cm²).
• Typing ved utbrudd: MLST, PFGE, WGS (whole genome sequencing) – klonalt utbrudd vs. sporadiske.

Klinisk tolkning og behandling

• Kolonisering ≠ infeksjon (krever kliniske tegn + inflammatorisk respons).
• Behandling basert på AST-resultat + klinisk bilde + kildekontroll (kateterfjernelse, drænering, debridement).
• Kombinasjonsterapi (β-lactam + aminoglykosid/fluoroquinolon) ved alvorlig infeksjon / risiko for resistensutvikling under behandling.
• Colistin / polymyxin B: reservere til multiresistente (XDR/PDR) – nefrotoksisitet, neurotoksisitet, TDM nødvendig.
• Nyere: ceftolozane-tazobactam, ceftazidim-avibactam, meropenem-vaborbactam, imipenem-relebactam, cefiderocol – aktivitet mot mange MDR P. aeruginosa.

Infeksjonskontroll

• Kontaktisolasjon (hansker, kittel) for pasienter med MDR P. aeruginosa.
• Håndhygiene, rengjøring/desinfeksjon (klor, peroksidbasert).
• Vannsystem: termisk / kjemisk desinfeksjon, punktfiltre (0,2 µm) ved immunkompromitterte.
• Antibiotikastyring (ASP) – redusere seleksjonspress.