Enzymanalyser: Måling av enzymaktivitet for diagnostikk og overvåking
Enzymanalyser (enzyme assays) er laboratoriemetoder for å måle koncentrasjon eller katalytisk aktivitet av enzymer i biologiske prøver (blod, urin, vev, spytt). De er sentrale for diagnose, prognose og overvåking av en rekke sykdommer.
Prinsipper for enzymmåling
- Enzymer katalyserer: Substrat → Produkt. Måling kan følge: substratsvinn, produktdannelse, kofaktorforbruk/dannelse (NADH/NADPH), pH-endring, varme, lys (luminescens/fluorescens), radioaktivitet.
- Kontinuerlige (kinetiske) analyser: Måler endring per tidsenhet (ΔA/min). Rask, sensitiv, automatiserbar. F.eks. spektrofotometrisk (340 nm for NADH/NADPH), fluorometrisk, kemiluminescens.
- Diskontinuerlige (endepunkts) analyser: Reaksjon stoppes etter fast tid, substrat/produkt måles. Radiometrisk, kromatografisk (HPLC/MS).
Viktige preanalytiske faktorer
- Temperatur: Enzymer er temperaturfølsomme. Standardisert (ofte 25°C, 30°C, eller 37°C).
- pH: Hvert enzym har optimalt pH-område. Bufferkapasitet kritisk.
- Joner/ko-faktorer: Mg²⁺, Zn²⁺, Mn²⁺, Cl⁻ osv. nødvendige for mange enzymer.
- Inhibitorer/aktivatører: I prøve (hemolys, lipemi, ikterus, medisiner) kan forstyrre.
- Provehandtering: Sentrifugeringstid/temp, frysing, frysingstauingssykluser påvirker stabilitet.
Klinisk bruk – utvalgte eksempler
| Enzym / Panel | Klinisk bruk | Tolkning |
|---|---|---|
| ALAT (ALT), ASAT (AST) | Levercelleskade (hepatitt, medisiner, alkohol, steatose) | ALT mer lever-spesifikk. AST/ALT ratio >1: alkoholisk, sirkulært. De Ritis ratio. |
| ALP, GGT | Kolestase (gallestase), levermetastaser, benlidelser (ALP), alkohol/medisiner (GGT) | ALP fra ben/lever skilles via ISOenzymer eller GGT (kun lever). |
| CK (kreatinkinase), CK-MB | Muskelskade (rhabdomyolyse, myositt, trauma), hjerteinfarkt (CK-MB, troponin overtok) | CK-MB relativt spesifikt, men troponin I/T er gullstandard for MI. |
| Troponin I / T (høysensitiv hs-cTn) | Akutt hjerteinfarkt (MI), myocarditt, takotsubo, nyresvikt, PE | Stigende/fallende mønster (Δ) avgjørende. 99. percentil = cut-off. |
| LDH (laktatdehydrogenase) | Generell celle-skade (hemolyse, malignitet, infeksjon, infarkt, lungemboli) | Isoenzymer (LDH-1 til LDH-5) gir kilde. Ikke spesifikk alene. |
| Amylase, Lipase | Akutt pankreatitt (lipase spesifikkere, lengre halveringstid) | Lipase > 3x ref = sterkt tyder pankreatitt. Amylase kan være høy ved salivarkjertel/sykdom/nyre. |
| ACP, PSA | Prostatakreft (PSA), benmetastaser (ACP) | PSA screening kontroversielt. fPSA/tPSA ratio, PSA-hastighet, MRI før biopsi. |
| Creatinin, Cystatin C | Nyrefunksjon (GFR estimat) | Cystatin C mindre påvirket av muskelmasse, kost. |
