FISH (Fluorescent In Situ Hybridisering): Prinsipp, bruk og begrensninger
FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) er en molekylær cytogenetisk teknikk som bruker fluorescerende DNA-sonder til å vise spesifikke gener eller kromosomavsnitt i celler. Metoden er rask, sensitiv og avgjørende i kreftdiagnostikk.
Hvordan FISH fungerer
- Sondedesign: Kort enkeltstreng DNA komplementær til målgen/kromosom, merket med fluorofor.
- Prøveforberedelse: Celler (f.eks. tumorbiopsi) oppvarmes for å denaturere DNA (dobbelstreng → enkelstreng).
- Hybridisering: Sonden binder til sin komplementære sekvens i prøven.
- Mikroskopi: Fluorescensmikroskop viser lyspunkt (signaler) for hvert gen/kromosom.
Hva FISH kan vise
- Kromosomale avvik: delesjoner, amplifikasjoner, translokasjoner.
- Genskopiantal (f.eks. HER2-amplifikasjon i brystkreft).
- Genlokalisering på kromosom.
- Virker også i ikke-delende celler (ulike karyotyping).
Klinisk brukseksempel: Brystkreft
Rutine FISH for HER2-status. Flere HER2-kopier = mer aggressiv kreft, gir rettet terapi (trastuzumab). FISH kan *ikke* brukes som generell screening eller finne ukjente gener.
Fordeler og ulemper
| Fordeler | Ulemper |
|---|---|
| Rask, nøyaktig, spesifikk, virker i interfase | Krever kjent sekvens/lokasjon, dyrere, ikke overalt tilgjengelig, ingen kvantitativ presisjon |
Tidligere:Bukspyttkjertelsvulst: Typer, symptomer, diagnostikk og behandling
Neste:Kognitiv svikt ved aldring: Normal forandring vs. demens