Radioimmunoassay (RIA): Prinsipp, historie og moderne alternativer
Radioimmunoassay (RIA) er en høysensitiv analysemetode som måler ultralave konsentrasjoner av hormoner, legemidler, vitaminer, tumormarkører ved å bruke radioaktivt merket antigen og antikroppkonkurranse. Utviklet 1950–60-årene av Rosalyn Yalow og Solomon Berson (Nobelpris 1977).
Prinsipp (kompetitivt bindingassay)
- Kjent antigen merkes med radioaktivt isotop (typisk ¹²⁵Jod) → *tracer*.
- Tracer blandes med fast mengde spesifikt antikropp → binder (B₀).
- Ukjent prøve (pasientserum) tilsettes → endogent antigen konkurrerer om antikroppbinding.
- Jo mer antigen i prøven, desto mindre tracer binder.
- Bundet og fritt tracer skilles (felling, adsorpsjon, magnetiske briketter).
- Radioaktivitet i fritt (eller bundet) fraksjon måles (gammateller).
- Standardkurve (kjente konsentrasjoner) → kvantifisering av ukjent.
Fordeler / begrensninger
| Fordeler | Begrensninger |
|---|---|
| Ekstrem sensitivitet (pg/mL – ng/mL) | Radioaktivt avfall, strålevern, lisenskrav |
| Høy spesifisitet (antikroppbasert) | Kostbare tellere, spesiallab |
| Velvaliderte referansemetoder | Langsom (inkubasjonstid), manuelle trinn |
Moderne erstatning: Ikke-radioaktive immunoassayer
- ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay): Enzymmerket antikropp/antigen, fargeendring måles i spektrofotometer. Standard i rutinelab.
- CLIA / ECLIA (Chemi-/Elektro-kemiluminescens): Høyere sensitivitet, bredt dynamisk område, automatiserte analysatorer (Roche Cobas, Abbott Architect, Siemens Atellica).
- FLIA / TR-FIA: Fluorescens / tidsoppløst fluorens (Delfia).
- Multiplex (Luminex xMAP): Flere analyt simultant (perlerbasert).
RIA brukes fortsatt som referansemetode og i spesialiserte lab (vitamin D visse metoder, visse steroidhormoner), men rutinediagnostikk har flyttet til automatiserte CLIA/ECLIA-plattformer.
Tidligere:Xenotransplantat vs. xenotransplantasjon: Dyrvev til mennesker – status og utfordringer
Neste:Dysgeusi (smaksforstyrrelse): Årsaker, diagnostikk og behandling