Hjem >> Medisin >> UltraffTM Gjær skjermteknologi brukes i Antistoff Discovery og Affinity Maturation

UltraffTM Gjær skjermteknologi brukes i Antistoff Discovery og Affinity Maturation

Protein engineering har nå blitt en stor lovende bransje som tiltrekker seg oppmerksomheten til hele biologiske verden. Det er mange grener i den. Gjær skjerm er den som må nevnes.

Det er en teknikk som har vært vilt brukes innen protein engineering. Professor K. Dane Wittrup og hans team publisert første denne teknikken i sitt laboratorium. Senere ble det solgt til Abbott Laboratories i år 2001. Fra perspektivet av tid, er det fortsatt en relativt ny innen protein engineering.

A-proteinet av interesse er vist som en fusjon til den Aga2p protein på overflaten av gjær. Denne spesielle type protein er naturligvis benyttes av gjær til å formidle kontakten mellom cellene i parings av en gjærcelle, ved hvilken visning av et protein ved Aga2p rager proteinet fra celleoverflaten. Denne fremgangsmåten har minimalisert den potensielle interaksjoner med andre molekyler på gjærcelleveggen. Bruken av magnetisk separasjon og flowcytometri i forbindelse med et gjær-baserte bibliotek er en svært effektiv metode for å isolere høyaffinitets protein ligander mot nesten en hvilken som helst reseptor gjennom rettet evolusjon.

Denne unike form for protein engineering gjør det mye bedre i uttrykket og behandling av eukaryote, kvalitetskontroll mekanismer eukaryote sekretoriske vei, minimal aviditet effekter og kvantitativ bibliotek screening gjennom fluorescerende-aktivert celle sortering (FACS) sammenlignet med andre in vitro evolusjon metoder. Gjær er en eukaryot organisme som gjør det mulig for komplekse posttranslasjonelle modifikasjoner til proteiner som ingen andre skjerm bibliotekene er i stand til å gi.

Forskere i Creative Biolabs konstruert et fullt menneske, ikke-immune bibliotek for de novo oppdagelsen av terapeutisk relevant antistoffer. Dette biblioteket består av 109 humane antistoff scFv fragmenter fra 16 givere. Alle disse fragmentene ble klonet og uttrykt i gjær overflaten. De fikk nanomolar affinitet scFvs med flowcytometri eller magnetiske perle baserte metoder og UltraffTM Gjær skjermteknologi. Uten målbare klonal mangfold tap, kan gjær biblioteket utvides til 1010 fold, som refererer til ubestemt utvidelse av bibliotekene. Alle scFv-kloner direkte vurdert på gjærcelleoverflaten ved strømningscytometri og immunofluorescent merking, unngå separasjonstrinn for uttrykk, subkloning og rensing. Disse har demonstratedthat de kan brukes for høy gjennomstrømming antistoff isolasjon for proteomikk studien.

I tillegg Creative Biolabs har skapt gjær skjerm scFv bibliotek HuscL-YDP av neste generasjon og fullt menneske for de novo oppdagelse av terapeutisk relevante antistoffer. scFv er den mest egnede proteinet som skal vises på gjær overflate på grunn av den relativt lille størrelse og brede anvendelser. Sitt bibliotek er basert på to liter blod fra ca 20 givere av varierende alder og genetiske bakgrunn. Dette biblioteket består av over 109 kloner kan bli vist med flowcytometrisk eller magnetiske kuler baserte metoder i kombinasjon med den unike fag teknologi.

Creative Biolabs er en ledende tilpasset tjenesteleverandør som har lang erfaring i gjær display. UltraffTM Gjær skjermteknologi utviklet er i utbredt bruk av antistoff oppdagelse og affinitet modning. Lær mer om Creative Biolabs.