ELISA-protokoll: Trinnvis veiledning for immunologisk deteksjon av antigen/antistoffer

ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) er en standard metode for å påvise antigener (sykmakere) eller antistoffer. Brukes til HIV, malaria, kolera, meslinger, kusma mv. Protokollen varierer litt per type, men prinsippet er felles.

Grunnprinsipp

Enzymmerket antistoff (antiglobulin) + substrat → fargeendring hvis målstoff er til stede. Fargeintensitet ∝ konsentrasjon. Måles med plateleser.

Tre hovedtyper

• Direkte ELISA: Enklest. Enzym-antistoff binder direkte til antigen. Påviser antigen.
• Indirekte ELISA: Påviser antistoffer. Fangstantigen binder pasientens antistoff → enzymantistoff mot menneske-IgG.
• Sandwich ELISA: Påviser antigen. To antistoffer (fangst + deteksjon) binder antigenet «som en sandwich». Høy spesifisitet.
• Konkurranse ELISA: Mest sensitivt for lave konsentrasjoner. Enzymmerket antigen og prøveantigen konkurrerer om antistoffbinding. Fargeendring omvendt proporsjonal med prøveantigenkonsentrasjon.