TSA-behandling induserer celleapoptose og påvirker p53/Akt-bane

Yan et al. studerte cellelinjer med distinkte p53-mutasjoner (LY1, LY8) og DoHH2-celler med mutasjoner i p53-asetyleringssteder. Asetylering av villtype p53 forbedrer stabiliteten, men ingen oppregulering av acetyl-p53 ble sett i DoHH2 etter TSA-behandling; villtype p53-protein ble ustabilt og falt tidsavhengig. Alcendor et al. observerte lignende fenomener i hjertemuskelceller: p53-asetylering og transkripsjonsaktivitet økte ikke med TSA. Reduksjon av villtype p53 kan skyldes regulering av HDAC-hommere på p53-transkripsjon.

Peltonen et al. fant at TSA stabiliserte villtype p53 i melanomceller, men p53-akkumulering ble overstyrt av nedregulering av p53 mRNA, med netto reduksjon i protein. Mekanismene for p53-asetylering på villtype og mutante proteiner i ulike svulster etter HDAC-inhibitorer krever videre undersøkelse. Akt-banen spiller viktig rolle i cellevekst og er hyppig endret i svulster. Hemming av over-fosforylert Akt er et lovende mål i tykktarmskreft. P-Akt uttrykk ble notert i alle tre cellelinjer og nedregulert etter TSA. Chen et al. viste at LBH (en annen HDAC-inhibitor) medierte Akt-defosforylering i DLBCL-celler via økt binding av PP1 til Akt.

Vi undersøkte nedstrøms mål i Akt-banen. Oppregulering av p21 ble ofte observert, mens data på p27 var mindre. Undertrykking av cyclin D1 fra HDAC-inhibitorer ble notert i mantelcellelymfom. I vår studie så vi større endringer i p27 og cyclin D1 enn p21 etter TSA. Både p21 og p27 ble oppregulert, cyclin D1 nedregulert via redusert P-Akt-uttrykk, noe som medfører cellecyklusarrest. TSA induserte også apoptose i LY1 og LY8-celler. Bcl-2 (anti-apoptotisk) ble nedregulert etter TSA i LY1/LY8. I normale germinalsentre er Bcl-2 inaktivert, noe som tillater apoptose; abnormal Bcl-2-bevaring bidrar til krefttransformasjon. Vår analyse viste at Bcl-2-undertrykking skjedde på translasjonelt nivå i LY1/LY8 etter TSA, muligens som kombinasjonseffekt av Akt-defosforylering og p53-asetylering. I DoHH2-celler var Bcl-2-endringen unik. ALK-inhibitorer.

Bcl-2-genomorganisering ble rapportert i LY1, DoHH2 og LY8, men detaljer om amplifisering mangler. Våre upubliserte data viser ingen synlig Bcl-2-amplifisering i de tre linjene. Forskjellige effekter på Bcl-2 kan skyldes ulike p53-asetyleringsnivåer. Redusert p53-asetylering kan bidra til DoHH2s resistens mot apoptose etter TSA ved IC50. De nøyaktige mekanismene bak TSA (en potent HDAC-inhibitor) i DLBCL-celler ble undersøkt: TSA undertrykte vekst med G0/G1 eller G2/M arrest og apoptose. HDAC-uttrykk varierte, med DoHH2 som viste høyest uttrykk av alle seks isoformer (HDAC1-6), noe som kan korrelere med TSA-følsomhet.